广东郑州荧光染料
D-荧光素是荧光素酶 (Luc) 的天然底物,可催化萤火虫产生典型的黄绿色光。该反应的 560 nm 化学发光在几秒钟内达到峰值,当底物荧光素过量时,光输出与荧光素酶浓度成正比。荧光素酶 (luc) 基因是用于研究和药物筛选的流行报告基因。化学发光技术几乎没有背景,使得 luc 报告基因成为检测低水平基因表达的理想选择。标准闪烁计数器可以可靠地测量低至 0.02 pg 的荧光素酶。除了作为基因表达报告者的作用外,荧光素酶还常用于极其灵敏的 ATP 检测中[1]。我们提供萤火虫荧光素酶 (HY-P1004)、荧光素游离酸 (HY-12591A) 及其水溶性钠盐 (HY-12591) 和钾盐 (HY-12591B)。Super Fluor活化酯(与Invitrogen的Alexa Fluor活化酯完全相同)。广东郑州荧光染料
第二种***使用的DNA染色方法是Hoechst染料,**初由化学公司HoechstAG生产。Hoechst33258、Hoechst33342和Hoechst34580都是邻苯二甲酰亚胺,具有向A-T富集区插入的趋势,因此后者不常使用。与DAPI相似,此类染料受到紫外线激发并在455nm下发射比较大值,在无结合状态下变为510–540nm。Hoechst染料还具有细胞渗透作用,因此可用于固定细胞和活细胞。与DAPI不同是,Hoechst染料毒性更低。DNA染色剂碘化丙啶无法透过细胞膜。在细胞培养中,因为该染色剂无法进入完好的细胞内,所以常常被用来区分活细胞和死细胞。碘化丙啶也是一种结合剂,但对不同的碱基没有特异性。在核酸结合态下,其比较大激发波长为538nm,比较高发射波长为617nm。未结合状态下碘化丙啶的比较大激发和发射被移到较短的波长和较弱的强度。它也可以在不改变其荧光特性的情况下与RNA结合。要区分DNA和RNA,必须使用足够的聚合酶。宁夏荧光染料ICGSuper Fluor 680(效果同Alexa Fluor 680)琥珀酰亚胺酯荧光染料。
小动物***成像技术(invivoimagingtechnology)是利用高灵敏度的光学检测仪器直接检测动物***体内的细胞活动和基因行为研究的一类技术,是近年来发展**快的生命科学研究方法,是**直接观察细胞和分子在体内行为的新兴技术,已广泛应用于生命科学研究的各个领域[1]。***动物体内光学成像主要采用生物发光与荧光发光两种技术。生物发光是利用荧光素酶报告基因在***内表达产生的荧光蛋白与体外注射的荧光素底物发生化学反映产生荧光。而荧光发光成像技术是将荧光物质或荧光物质标记的小分子物质如基因、细胞也可是小分子药物、抗体、纳米材料等导入到***体内,通过小动物***成像系统的激发光源激发荧光集团到达高能量状态,而后产生波长较激发光长的发射光,然后通过高灵敏度制冷CCD镜头探测到***内的发射光。通过***成像技术可以观测***动物体内**的生长和转移、炎症的发生、特定基因的表达和药物作用效果等生物学过程。
Cy7DiC18(DiR)是一个亲脂性、近红外荧光花青染料。这个染料常用于标记细胞质膜。Cy7DiC18(DiR)的两个18-碳链插入到细胞膜,从而进行特定的、稳定的细胞染色,几乎不会发生细胞间的染料转移。Cy7DiC18(DiR)(近红外荧光)和其他细胞膜荧光染料如DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)配合使用,为多色成像和流式细胞分析提供了有效的工具。Cy7DiC18(DiR)染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定透化(室温下用0.1%TritonX-100透化)后,也可以很好地进行质膜染色。
1、Cy7DiC18(DiR)染色固定的细胞或组织样品时,通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 荧光染料可以单独使用,也可以组合成复合荧光染料使用。
罗丹明123一种可对活细胞线粒体染色的细胞染色试剂。罗丹明123可透过细胞膜且在活细胞的线粒体内聚集,并发出黄绿色荧光。罗丹明123***用作检测线粒体膜电位,也常用于细胞凋亡检测。由于细胞内ATP的量与罗丹明123的荧光强度之间有相关性,此荧光染料被应用于检测细胞内的ATP。罗丹明123的比较大激发波长为507nm,比较大发射波长为525nm。在荧光显微镜下观察,呈现黄绿色荧光。
一:工作液配制用缓冲液或者预热的培养液直接稀释储存液到需要的工作液浓度(1~20µM),充分混匀。具体的工作液浓度使用者要根据自身实验体系进行调整。【注意】:对于细胞实验,要控制好总体稀释倍数,DMSO在培养液中的浓度不能超过0.1%,以避免DMSO对细胞的影响。
二:荧光显微镜观察1、用载玻片准备细胞。细胞数目应为5×104~5×105个/mL。2、在载玻片上孵育细胞,用PBS或HBSS洗涤细胞。3、将Rhodamine123工作液加入载玻片并在37℃下孵育30min至1小时。4、去除Rhodamine123溶液并用培养液洗涤细胞(洗涤细胞后如果要固定,加入10%福尔马林缓冲液并孵育15~20min,接着用PBS洗涤)。5、荧光显微镜观察细胞。 染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一类亲脂性荧光染料家族,用于标记细胞膜和疏水性组织。南京荧光染料激发
Super Flour 系列荧光探针,具有更强的荧光强度,更广的pH应用范围(pH 4~10), 更好的抗淬灭性。广东郑州荧光染料
一、体外生物发光试验荧光素试剂的制备:D-荧光素,钾盐,无菌纯水,完全培养基(自行配置)1、用无菌水制备100X荧光素原液(15mg/ml),轻轻颠倒摇动至荧光素完全溶解。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。2、将D-luciferin,potassiumsalt溶解于预热好的组织培养基中制备成浓度为150μg/ml的工作液。用组织培养基1∶100稀释储存液,配置工作液(终浓度150μg/mL)3、去除培养细胞的培养基图像分析前,向细胞培养板中添加1×荧光素工作液,然后进行图像分析-注射器滤膜过滤除菌,0.2μm注:成像前在37℃下对细胞进行短时间孵育可增强信号。广东郑州荧光染料
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